فلورسانس در حالت Hybridization
Fluorescence in situ hybridization (FISH) یکی از تکنیک های متعددی است که برای جستجوی DNA های سلولی شما مورد استفاده قرار می گیرد، به دنبال وجود یا عدم وجود ژن های خاص یا بخشی از ژن ها است.
بسیاری از انواع مختلف سرطان مرتبط با ناهنجاری های شناخته شده ژنتیکی هستند. و به طور ژنتیکی، ما فقط درباره وراثت صحبت نمی کنیم. در طول زندگی، سلول ها وقتی می توانند تقسیم و رشد کنند، اشتباه می کنند.
جهش در DNA که در ارتباط با سرطان است ممکن است در این سلول ها انباشته شود.
چگونه FISH کار می کند؟
FISH یک تکنیک است که از پروب های فلورسنت برای شناسایی ژن های خاص یا قطعات ژن (توالی DNA) استفاده می کند. پرسنل آزمایشگاه مرکز پزشکی و انکولوژیست ها از FISH برای کمک به ارزیابی بیماران مبتلا به سرطان استفاده می کنند و گاهی اوقات برای نظارت بر بیمارانی که قبلا با سرطان تشخیص داده شده و درمان شده اند.
FISH را می توان با استفاده از انواع مختلف نمونه بر اساس محل و نوع سرطان مشکوک انجام داد: سلول های تومور حاصل از خون محیطی، از بیوپسی مغز استخوان یا از بیوپسی گره لنفاوی و رسپیرین ثابت بافت پارافین تعبیه شده (این اشاره به نمونه ای از بافتی که در آزمایشگاه پردازش می شود و به یک نوع موم تعبیه شده است، باعث می شود آن را سخت تر کند، بنابراین می توان آن را به بخش های نازک تقسیم کرد و برای مشاهده در زیر میکروسکوپ نصب شده).
چه حرفهایی را می خواهی؟
"H" در FISH اشاره به hybridization.
در Hybridization مولکولی، یک دنباله DNA یا RNA مارک شده به عنوان یک پروب مورد استفاده قرار می گیرد - اگر شما می خواهید یک آجر قرمز لگو را تجسم کنید. پروب برای پیدا کردن همتای آجری لگو یا توالی DNA در یک نمونه بیولوژیکی استفاده می شود.
DNA در نمونه شما مانند شمعهای آجر لگو است و اکثر آجرهای این شمعها با پروب قرمز ما مطابقت ندارند.
و تمام آجر شما منظم به 23 جفت ستون آجر تبدیل شده است - هر شمع یکی از کروموزوم های همولوگ زوج شما، بیشتر یا کمتر است. بر خلاف آجرهای لگو، پروب قرمز لگو مانند یک آهنربا قوی است و بدون نیاز به مرتب کردن بر روی ستون ها، مسابقه آن را پیدا می کند.
"F" به fluorescence اشاره دارد. پروب قرمز ما ممکن است در شمع آجر از دست داده است، بنابراین آن را با رنگ فلورسنت رنگی به طوری که آن را درخشش برچسب. هنگامی که آن را در میان 23 شمارنده زوج پیدا می کند، یک برچسب فلورسنت محل سکونت خود را نشان می دهد. بنابراین، اکنون می توانید ببینید که چگونه محققان و پزشکان ممکن است از FISH برای کمک به شناسایی کجا (کدام یک از کروموزوم ها) یک ژن خاص برای یک فرد مشخص شده است.
"من" و "S" در محل حضور دارند . این به این واقعیت اشاره دارد که آجر قرمز آبی ما در جستجوی نمونه ای است که در آن قرار داده اید .
درباره سرطانهای مشخص چه؟
FISH و دیگر روش های hybridization in situ برای تشخیص انواع ناهنجاری های کروموزومی، تغییرات در مواد ژنتیکی، تغییرات در کروموزوم ها، از جمله موارد زیر استفاده می شود:
حذف - بخشی از یک کروموزوم رفته است
Translocation - بخشی از یک کروموزوم شکسته می شود و بر روی دیگری کروموزوم قرار می گیرد
Inversion - بخشی از یک کروموزوم از بین می رود و مجددا وارد می شود، اما در جهت معکوس
تکثیر - بخشی از یک کروموزوم در نسخه های بیشماری از سلول موجود است
هر نوع سرطان ممکن است مجموعه ای از تغییرات کروموزومی و پروب های مربوطه را داشته باشد. FISH نه تنها به شناسایی تغییرات اولیه ژنتیکی در فرآیند بیماری مانند سرطان کمک می کند، بلکه می تواند برای پاسخ به درمان و رفع بیماری نیز مورد استفاده قرار گیرد.
تغییرات ژنتیکی که توسط FISH شناسایی شده است، گاهی اوقات اطلاعات اضافی در مورد چگونگی رفتار سرطان فرد را بر اساس آنچه در گذشته در افرادی با همان نوع سرطان و تغییرات ژنتیکی مشابه دیده می شود، ارائه می دهد. گاهی اوقات FISH بعد از تشخیص قبلا مورد استفاده قرار گرفته است، برای جمع آوری اطلاعات اضافی که ممکن است پیش بینی نتیجه یا بهترین درمان بیمار را پیش بینی کند.
FISH می تواند ناهنجاری های کروموزومی را در لوکمی ها ، از جمله در لوسمی مزمن لنفوسیتی (CLL)، شناسایی کند. برای لوسمی لنفوسیتی مزمن / لنفوم لنفوسیت کوچک، FISH اجازه می دهد تا بیماران برای پیدا کردن رده پیش آگهی خود را: خوب، متوسط و یا ضعیف. در لوسمی لنفوبلاستی حاد (ALL)، ژنتیک سلول های لوسمی می تواند به شما در مورد سطح خطر ابتلا به سرطان کمک کند و به راهنمای تصمیم گیری درمانی کمک کند.
پانل های FISH نیز برای لنفوم، مولتیپل میلوما، اختلالات تکثیر سلولی پلاسما و سندرم میلوودیس پلازا در دسترس هستند. به عنوان مثال، در مورد لنفوم سلول گوسفند، حرکتی است که FISH می تواند به نام GH / CCND1 t (11؛ 14) که اغلب با این لنفوم مرتبط است، وجود دارد.
چرا ماهی؟
مزیت FISH این است که لازم نیست بر روی سلول هایی که به طور فعال تقسیم می شوند انجام شود. آزمایشات سیتوژنتیک معمولا حدود سه هفته طول می کشد، زیرا سلول های سرطانی باید قبل از اینکه بتوانند آزمایش شوند، در ظروف آزمایشگاهی حدود 2 هفته رشد می کنند. در مقابل، نتایج FISH معمولا از آزمایشگاه در عرض چند روز در دسترس است.
> منابع:
کد های CPT تست سیتوژنتیک سرطان
> فلورسانس در حالت Hybridization (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> فلورسانس در حالت Hybridization (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> DJ Wolff، Bagg A، Cooley LD، و همکاران. راهنمایی برای تست هیبریداسیون فلورسانس در حالت اختلالات هماتولوژیک. مجله تشخیص مولکولی: JMD. 2007؛ 9 (2): 134-143.